刘安琪
ROS响应型纳米药物治疗角膜新生血管的探索
报告人:刘安琪
所在单位:中国人民解放军总医院
报告人简介:刘安琪，中国人民解放军总医院主治医师，眼科学博士，博士后师从付小兵院士。全军高层次科技创新人才，北京市科技新星，中国眼视光明日之星。长期从事眼部组织损伤修复和纳米药物递送研究。主持国家自然科学基金等国家和省部级课题4项。以项目骨干参与“十四五”国家重点研发计划等4项重大/重点课题。以主要完成人获北京市科技进步一等奖，在ACS AMI，IOVS，Ocular Surface等TOP期刊发表论文13篇。授权专利7项，出版专著2部。获国际眼科英语论坛一等奖，优秀学位论文，国际眼科学术会议优秀论文等国内外大赛一等奖2项，二等奖2项。兼任中华中医药学会眼科分会青年委员和协同创新共同体委员，中国民族医药学会眼科分会理事等。
报告摘要:目的：使用组合化学方法，设计一类全新的ROS响应型纳米载体/siRNA-VEGF复合物（ROS-TK-n/siVEGF），并评估其对小鼠碱烧伤后CNV形成的抑制效果及作用机制。方法：体外培养GFP转染的人脐静脉血管内皮细胞系（HUVECs.eGFP），并筛选对GFP绿色荧光抑制效果最强的载体。免疫荧光检测氧化应激条件下纳米复合物在血管内皮细胞中的胞吞及释放效能。取健康“VEGFR2-Luciferase标记小鼠”100只，随机平均分为PBS组、Scramble组、非ROS响应型纳米复合物组、ROS响应型纳米复合物组及雷珠单抗组，每组各20只。将右眼敷1mol/L NaOH滤纸片8s，建立碱烧伤模型，间日结膜下定量注射给药。前节照相、小动物活体成像仪及HE染色检测不同处理组CNV生长情况。qPCR检测不同时间梯度炎症介质mRNA表达量。免疫荧光检测角膜组织中CD31、VEGF、VEGFR1的位置及含量。DHE染色测定角膜组织中ROS含量。WB验证VEGF信号通路。测定纳米复合物的安全性。结果：ROS-TK-5是抑制HUVECs.eGFP绿色荧光最强的载体。ROS-TK-5/siVEGF在氧化应激条件下可以促进VEGF siRNA在胞内释放。ROS-TK-5/siVEGF在碱烧伤后较其余组更显著降低新生血管的数量及面积，与活体荧光信号变化相一致。病理学证实ROS-TK-5/siVEGF可以减少角膜炎症细胞数量并减少CNV。qPCR证实ROS-TK-5/siVEGF可以降低炎症介质表达。免疫荧光提示ROS-TK-5/siVEGF可以减轻角膜基质层CNV形成。碱烧伤早期ROS含量升高。组织水平及细胞水平WB证实纳米复合物可以抑制VEGF信号通路活化。结论：ROS-TK-5/siVEGF在氧化应激下促进VEGF siRNA释放，并较其他组更显著抑制小鼠碱烧伤后角膜新生血管的形成。【关键词】：碱烧伤；角膜新生血管；纳米药物；活性氧簇；小干扰RNA；缩硫酮；血管内皮生长因子
